Browsing by Author "Çiftçi, Muhammed Haluk"

Now showing 1 - 1 of 1

Investigation of the Effect of Some Water-Soluble Vitamins on the Activity of Angiotensin Converting Enzyme Purified From Sheep Plasma
(2023) Çiftçi, Muhammed Haluk; Türkoğlu, Vedat
Anjiotensin konverting (dönüştürücü) enzim (ACE, EC 3.4.15.1) kan basıncının düzenlenmesinde çok önemli bir faktördür. Bu çalışmada ACE, koyun plazmasından afinite kromatografisi metodu ile tek adımda saflaştırıldı. ACE enziminin spesifik aktivitesi 4879 EU/mg protein ve saflaştırma katsayısı 8636 kat olarak hesaplandı. SDS-PAGE yöntemi kullanılarak ACE enziminin molekül ağırlığı 60 kDa ve 70 kDa olmak üzere iki alt birim olarak bulundu. Koyun plazmasından saflaştırılan ACE için optimum pH aralığı 6.4-6.8 ve optimum sıcaklık 40 oC olarak belirlendi. KM ve Vmax değerleri sırasıyla 0.49 mM ve 101.01 (µmol/dk).mL-1 olarak hesaplandı. Koyun plazmasından saflaştırılan ACE aktivitesi üzerine tiamin (B1 vitamini) ve riboflavin (B2 vitamini) bileşiklerinin etkisi araştırıldı. Tiamin ve riboflavin ACE aktivitesi üzerine önemli ölçüde inhibisyon etkisi gösterdi. Ayrıca spesifik bir ACE inhibitörü olan kaptopril bileşiğinin inhibisyon etkisi belirlendi. Grafiklerin denklemleri kullanılarak IC50 değerleri sırasıyla 1142.09 µM, 12.11 µM ve 1.60 nM olarak bulundu. Bu bileşiklerin Ki değerlerini ve inhibisyon türlerini belirlemek için Lineveawer-Burk grafikleri çizildi. Tiamin ve riboflavin bileşiklerinin inhibisyon türü için dönüşümlü-yarışmasız inhibisyon olarak bulundu. Kaptopril için inhibisyon tipi dönüşümlü-yarışmalı inhibisyon olarak belirlendi. Tiamin, riboflavin ve kaptopril için Ki değerleri sırasıyla 1352.04 µM, 12.30 µM ve 1.06 nM olarak belirlendi. Bu çalışmada tiamin ve riboflavin vitaminlerinin ACE inhibitörü potansiyeline sahip olduğu sonucuna varıldı.