Browsing by Author "Akman, Esrin"

Now showing 1 - 2 of 2

Purification and Characterization of Van Lake Fish (Chalcalburnus Tarichii P.1811) Liver and Brain Acethylcholinesterase
(2009) Akman, Esrin; Türkoğlu, Vedat; Celik, Ismail
In this study, acethylcholinesterase was purified from liver and brain of Van Lake fish (Chalcalburnus Tarichii P.1811) by using affinity chromatography technique. The purification folds were determined as 142 and 344 for brain and liver, respectively. The purity of enzyme was controlled with sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDSPAGE). The optimal pH was determined as 7.5-8.5 for brain and liver, respectively. On the other hand, the optimal temperature was determined as 35oC for both liver and brain. Also, the highest activities were observed in concentration of 0.2 M (NH4)2SO4 as ionic strength for both liver and brain.
The Characterization of Purification of Acethylcholinesterase (EC 3.1.1.7) Enzyme From the Brain and Liver of Lake Van Fish
(2007) Akman, Esrin; Türkoğlu, Y.doç. Vedat
Bu çalısma; Vangölü balıgının beyin ve karacigerindeki asetilkolinestenaz enziminin saflastırılması için etkili ve hassas bir saflastırma yöntemini içermektedir. Bununla beraber metabolizma için büyük öneme sahip bu enzimin bazı özellikleri incelenmistir. Saflastırma için kullanılan balıgın beyin ve karacigeri gerekli islemler yapıldıktan sonra pH'sı 8'e katı sodyumfosfat ile ayarlanarak, kolona tatbik edilecek hale getirildi. Saflastırma isleminde kullanılan affinite jeli, CNBr ile aktiflestirilen Sepharose-4B matriksine biyolojik ilgisi olan ligant (1-etil 3-3 dimetilaminopropil karbodiimid) baglanarak hazırlanan jel kolona doldurularak tampon A ile dengelendi hazırlanan kolona tatbik edildi. Kolon tampon B ile yıkandı. Yıkama islemi absorbansın 0,01'den küçük oldugu durumda son verildi. En son tampon C geçirilerek 5'ser ml halinde fraksiyonlar toplandı her bir fraksiyonunun 280 nm'deki kalitatif protein tayinleri, 545 nm'deki kantitatif protein miktarları ve aktivite tayinleri yapıldı. Aynı zamanda da; enzimin optimum sıcaklık, optimum pH, iyonik siddet etkisi arastırıldı.Yapılan çalısma sonucu beyinde saflastırma oranı 344 kat, karacigerde saflastırma oranı 142 kat olarak bulundu. Enzimin optimum pH'sı 8, optimum sıcaklık ise 35oC olarak bulundu. yonik siddet etkisinin arastırıldıgı çalısmada ise en yüksek aktivite ise 0.2 M Na H2 PO4 konsantrasyonunda görülmüstür. Anahtar kelimeler: Affinite Kromotogrofisi, Asetilkolinestenaz enzimi, Chalcalburnus tarichi, Saflastırma,