Protoplast Transformasyon Metodu Kullanılarak Alkalo-tolerant Bacillus Sp. Ksilanaz Geninin Gr (+) Bakterilere Transferi ve Ekspresyon Düzeyinin Araştırılması

Abstract

Bu çalışmada, Van gölü çevresindeki suyu çekilmiş alanlardan alınan toprak numunelerinden alkalo-tolerant Bacillus sp izolasyonu yapıldı. İzolatlar arasından alkalo-tolerant Bacillus sp. XIS l susu çalışmanın amacına uygun suş olarak seçilerek ksilanaz üretimi araştırıldı. Test suşlarında ksilanaz prodüksiyonunun plasmit kökenli olup olmadığı belirlendi. Araştırma neticesinde, ksilanaz prodüksiyonu açısından negatif olan alkalo-tolerant Bacillus cereus P109 susu ise trasforme olmaya yönelik alıcı sus olarak bulundu. Ksilanaz pozitif alkalo-tolerant Bacillus sp. XI51 suşundan alkali lizi metoduyla plasmid izole edildi. Plasmit, protoplast transformasyon tekniği ile ksilanaz negatif Bacillus cereus P109 suşuna aktarıldı. Plasmid DNA agaroz jel elektroforezinde sepera edildi. Bu çalışma, alkalo-tolerant özellikte olan Bacillus sp. izolasyonu, alkalo-tolerant Bacillus sp. suşlarında ksilanaz prodüksiyonu belirlenmesi, plasmit kökenli olup olmadığı ve gen aktarım olanaklarının araştırılması amacıyla ele alındı.