In Vivo and in Vitro Investigation of Effect of Some Natural Hormones and Estrogens Like Chemicals on Vitellogenin Synthesis in Chalcalburnus Tarichi

Abstract

Bu çalışmada, inci kefaline (Chalcalburnus tarichi, Pallas 1811) enjekte edilen 17ß-estradiolun (E2); total ağırlık, karaciğer ağırlığı ve glikojen içeriği, gonad ağırlığı, hepatosomatik indeks (HSI), gonadosomatik indeks (GSI), plazma total protein ve vitellogenin (Vtg) seviyelerine etkileri araştırıldı. E2 enjeksiyondan sonra, ölçülen bütün değerlerde artış vardı. Ancak; bunlardan sadece karaciğer ağırlığı, HSI, plazma total protein ve Vtg seviyelerindeki artış istatistiksel olarak anlamlı bulundu (P<0.05). E2 enjeksiyonu sonucunda karaciğer glikojen içeriğinin değişmediği histolojik olarak gözlendi. Ayrıca SDS-PAGE ve Western Blot analizi sonucunda inci kefali Vtg'nin molekül ağırlığının 145 kDA olduğu belirlendi.Jüvenil inci kefali hepatosit kültüründe E2, insan (hrGH) ve sazan rekombinant büyüme hormonu (crGH), insülin (İ), progesteron (P) ve 11-deoksikortizol (11-DOC) hormonlarının Vtg sentezine etkileri araştırıldı. Kültürlerde hepatositler serum kullanılmadan iki haftadan fazla sürede yaşatıldı. E2 uygulanan kültürlerdeki hepatositlerde sentezlenen Vtg immunofloresan metod ile görüntülendi. Kültüre uygulanan doğal hormonlardan sadece E2'nin Vtg sentezinde doza ve zamana bağlı olarak etkili olduğu, hrGH, crGH, İ, P ve 11-DOC'un Vtg sentezinde etkili olmadığı belirlendi. Bununla birlikte hrGH ve 11-DOC hormonları E2 ile birlikte uygulandığında, Vtg sentezinde artış olduğu belirlenirken (P<0.05); P ile E2 birlikte uygulandığında Vtg seviyesinin azaldığı tespit edildi.İnci kefali hepatosit kültüründe 17?-ethynil estradiolün (EE2) Vtg sentezinde etkili olduğu, nonylphenolun (NP) ise toksik etkiye sahip olduğu ve Vtg sentezinde etkili olmadığı belirlendi.

In this study, the effects of injected estradiol-17ß on the total weight, liver weight, gonad weight, hepatosomatic index (HSI), gonadosomatic index (GSI), plasma total protein and vitellogenin (Vtg) levels were investigated on Chalcalburnus tarichi. Although E2 injection caused an increase in all measured values, only liver weight, HSI, plasma total protein and Vtg levels were found to be statistically significant (P<0.05). After E2 injection the liver glycogen content did not change. In addition Chalcalburnus tarichi Vtg molecular weight was found to be 145 kDa according to SDS-PAGE and Western Blot analyses.In juvenil Chalcalburnus tarichi hepatocytes culture the effects of E2, human recombinant growth hormone (hrGH), carp recombinant growth hormone (crGH) insulin (I), progesterone (P) and 11-deoxycortisole (11-DOC) hormones on Vtg synthesis were investigated. The hepatocytes were maintained in culture for more than two weeks without addition of serum components. Vtg was visualised with immunoflouresan method in hepotocyte cultures suplemented with E2. Among natural hormones applied to culture, only E2 had an influence on Vtg synthesis with dose and time dependet manner, while hrGH, crGH, I, P, and 11-DOC had no effect. When the combination of hrGH and 11-DOC was applied together with E2, Vtg synthesis showed an increase but when the combination of P with E2 was applied a decrease in Vtg level was determined (P<0.05).It has been found that in Chalcalburnus tarichi hepatocyte cultures 17?-ethynil estradiol (EE2) is effective on Vtg synthesis while nonylphenol (NP) is toxic and has no effect on Vtg synthesis.